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冷凍保護(hù)劑可分為滲透性和非滲透性兩類。滲透性冷凍保護(hù)劑可以滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是一些小分子物質(zhì),主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護(hù)劑不能滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是些大分子物質(zhì),主要包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羥乙基淀粉等。其中羥乙基淀粉是淀粉衍生物,羥乙基淀粉制備的幾種方法有水媒法制備、干法制備、溶媒法制備。羥乙基淀粉作為冷凍保護(hù)劑有什么作用呢?在紅細(xì)胞中可以防止紅細(xì)胞冷凍和溶解過(guò)程溶血,體內(nèi)支鏈淀粉羥乙基化后...
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右旋糖苷是聚合物類保護(hù)劑的其中一種,其保護(hù)劑還包括PVP,牛血清,聚乙二醇等。聚合物類保護(hù)劑的作用具有能提高生物制品混合液的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度等。有些生物制品中會(huì)加入多種聚合物類保護(hù)劑。右旋糖苷是若干葡萄糖分子脫水的聚合產(chǎn)物,又叫葡聚糖。其常作為生物制品冷凍干燥的低溫保護(hù)劑來(lái)選用。按分子量的不同,分為中分子和低分子及小分子等,以中分子右旋糖苷40為例介紹下其應(yīng)用。其分子量在4000左右。用作藥品凍干粉針劑的賦形劑在醫(yī)藥工業(yè)中廣泛使用。右旋糖苷40的加入使藥品形成均一蓬松的凍干塊,...
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冷凍干燥作為蛋白類藥物干燥常用的方法,能保持蛋白類藥物的活性,干燥后能保持原形,體積幾乎不變,凍干藥品疏松多孔,呈海綿狀,復(fù)水性好。藥品脫水*能長(zhǎng)期保存。想要凍干藥品復(fù)水性好并且能長(zhǎng)期保存,凍干工藝及優(yōu)化很重要,例舉幾個(gè)方面如冷凍干燥過(guò)程中凍結(jié)中形成的冰晶形態(tài)和大小以及玻璃化程度不光影響干燥效率,還影響凍干藥品的質(zhì)量。在凍結(jié)過(guò)程中要考慮配方、凍結(jié)速率、凍結(jié)方式以及是否退火等問(wèn)題。配方中如果固體含量少于2%,藥品的性能就會(huì)不穩(wěn)定,尤其在干燥過(guò)程中,藥品微粒不能粘在基質(zhì)上,溢出的...
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Tris又叫三羥甲基氨基甲烷。是一種白色結(jié)晶或粉末,溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,是一種有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。其本身有很高的緩沖能力,在水中溶解度高,對(duì)很多酶呈惰性反應(yīng),它的這一特性使得Tris成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。用于穩(wěn)定反應(yīng)體系的pH,在pH7.5-9.0之間有較強(qiáng)的緩沖能力。其緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲(chóng)核纖層蛋白的中間纖維的形成。其本身也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。熒光PCR凍干體系優(yōu)化...
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多元醇類凍干保護(hù)劑包括甘油、甘露醇、山梨糖醇、肌醇、木糖醇、叔丁醇、側(cè)金盞花醇等,這一類凍干保護(hù)劑是比較常用較為普遍的凍干保護(hù)劑。以甘油作為凍干保護(hù)劑來(lái)介紹一下在蛋白質(zhì)凍干中的作用。甘油具有良好的滲透能力,可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部和胞內(nèi)大分子形成氫鍵以取代干燥脫除的水分,從而維持蛋白質(zhì)、碳水化合物及脂肪等大分子活性物質(zhì)的原有結(jié)構(gòu)。此外,甘油還可以起到降低細(xì)胞脫水皺縮和緩解復(fù)水腫脹的效果。另外醇和糖類相似均具有醇和糖類羥基官能團(tuán),均能產(chǎn)生“優(yōu)先水化作用”以及改變體系的玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變溫度等,...
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二糖又名雙糖,雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個(gè)單糖分子經(jīng)縮合反應(yīng)除去一個(gè)水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成,蔗糖由葡萄糖和果糖組成,麥芽糖由兩個(gè)葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護(hù)劑,能夠有效增加蛋白凍干穩(wěn)定性,但是用它們作保護(hù)劑得到的無(wú)定形蛋白凍干固體具有較低的Tg,對(duì)儲(chǔ)存過(guò)程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg,增加凍干后穩(wěn)定性,但是對(duì)于低濃度蛋白活性保護(hù)作用不理想。例如蔗糖對(duì)蛋白質(zhì)具有保護(hù)作用,葡聚糖在冷凍和干燥過(guò)程中不能防止蛋白質(zhì)...
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聚合物又稱加聚物。由一種單體經(jīng)聚合(加聚)反應(yīng)而成的產(chǎn)物。分子具有重復(fù)的結(jié)構(gòu)單位。包括晶態(tài)結(jié)構(gòu)、非晶態(tài)結(jié)構(gòu)、取向態(tài)結(jié)構(gòu)以及織態(tài)結(jié)構(gòu)。聚合物包括聚乙二醇、PVP、明膠、聚乙烯亞胺等。聚合物常用作為蛋白質(zhì)的冷凍保護(hù)劑,通常聚合物的穩(wěn)定作用取決于聚合物的多重性質(zhì),如優(yōu)先從蛋白質(zhì)表面析出、表面活性、使蛋白質(zhì)溶液私度升高從而阻止其他小分子(如糖及多輕基化合物)的結(jié)晶、抑制冷凍過(guò)程中pH值的劇烈變化等。不同聚合度及濃度的聚合物所提供的保護(hù)作用不同,如聚合度大的PvP有著較高的玻璃化溫度,...
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氨基酸是含有氨基和羧基的一類有機(jī)化合物的通稱。目前發(fā)現(xiàn)的天然氨基酸就有300多種,基本氨基酸也有二十個(gè)品鐘。氨基酸應(yīng)用于食品行業(yè)、醫(yī)藥行業(yè)、化妝品行業(yè)等。氨基酸是常見(jiàn)的蛋白質(zhì)保護(hù)劑之一。在冷凍過(guò)程中,低濃度的甘氨酸可通過(guò)抑制10或100mmol/L磷酸緩沖鹽結(jié)晶所致pH值的改變而阻止蛋白質(zhì)藥物變性。無(wú)定型甘氨酸可阻止凍干過(guò)程中重組人生長(zhǎng)激素的聚集;結(jié)晶型甘氨酸能升高成品的塌陷溫度,阻止因塌陷而引起的蛋白質(zhì)藥物的破壞。常用的氨基酸類蛋白質(zhì)保護(hù)劑有脯氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸...
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